代码收藏家技术教程 2025-05-24

FITC-PEG-BIOTIN、Biotin-peg-fitc荧光示踪使用指南：荧光素-聚乙二醇-生物素的应用指南

FITC-PEG-BIOTIN（荧光素-聚乙二醇-生物素）

一、描述：

FITC-PEG-BIOTIN 是一种三功能连接分子，由荧光素（FITC）、聚乙二醇（PEG）和生物素三部分组成。FITC 具备绿色荧光示踪功能（Ex/Em：495/519 nm），PEG 提供分子柔性和亲水性，可增强溶解性与稳定性，而生物素能特异性结合亲和素或链霉亲和素。此构造常用于构建荧光标记的靶向系统、生物成像、纳米载体修饰和亲和捕获等研究。适合在细胞实验、诊断检测或蛋白探针标记中使用，兼具识别与成像双重功能。

中文名称：荧光素标记聚乙二醇-生物素

英文名称：FITC-PEG-Biotin

别名：荧光生物素-PEG、FITC-PEGₙ-Biotin、FITC-PEGylated Biotin

CAS号：无固定CAS（为定制连接分子）

结构类型：FITC—PEG—Biotin（三元功能分子）

结构式：

二、分子构成与说明

FITC-PEG-Biotin 是一种三功能修饰分子，由以下三部分组成：

1. FITC（Fluorescein Isothiocyanate）

提供绿色荧光信号，便于可视化标记或荧光成像；

通常通过异硫氰酸酯与氨基反应形成稳定硫脲键。

2. PEG（聚乙二醇）

提高分子亲水性和柔韧性；

分子量常用规格为：PEGₙ = 500、1000、2000、3400、5000；

通过线性或单端官能化PEG提供空间间隔作用，减少非特异性结合。

3. Biotin（生物素）

可与链霉亲和素/亲和素高亲和结合（Kd ≈ 10⁻¹⁵ M）；

用于靶向捕获、固定化、免疫分析等生物识别场景。

三、物化属性

项目	参数
分子量	约 800–6000 Da（取决于 PEG 分子量）
外观	淡黄色至橙黄色固体或粘稠液体（低MW为固体，高MW为粘稠液）
溶解性	良好溶于水、PBS、DMSO、DMF、乙醇等；不溶于醚类或烃类溶剂
荧光激发波长	λ_ex ≈ 490–495 nm
荧光发射波长	λ_em ≈ 518–520 nm（绿色荧光）
稳定性	干燥避光条件下稳定，溶液中较易光解
储存条件	干燥粉末建议 -20°C 密闭避光储存；水溶液推荐分装于避光小管中冷冻保存
pH 稳定范围	*佳使用范围为 pH 6.5–8.0

四、制备方法简介

FITC-PEG-Biotin 典型合成路线如下：

1. 合成 PEG-Biotin：通过 NHS-Biotin 与氨基修饰 PEG 发生酰胺键反应；

2. 连接 FITC：使用 FITC 与 PEG-Biotin 末端氨基反应，形成稳定的 FITC-PEG-Biotin；

3. 纯化：使用透析、凝胶过滤或 HPLC 纯化；

4. 干燥：低温冻干以便于储存与运输。

五、主要应用领域

1. 荧光示踪与成像

可用于细胞、组织、纳米粒子的可视化；

绿色荧光适配多种共聚焦显微镜、流式细胞仪检测系统。

2. 亲和素-生物素系统中的荧光标记探针

与亲和素/链霉亲和素偶联物结合实现高亲和荧光成像或固定化；

常用于 ELISA、生物芯片、磁珠捕获、荧光免疫分析等。

3. 纳米材料功能化修饰

修饰脂质体、纳米粒、磁珠、纳米胶束、水凝胶等；

提供荧光与靶向双重功能。

4. PEG药物载体或蛋白偶联剂的构建

构建荧光示踪的 PEGylated 载药系统；

也可用于蛋白偶联物追踪研究其体内外行为。

六、常见规格与形式

名称	PEG分子量	形式
FITC-PEG500-Biotin	500 Da	固体	-20°C 避光储存
FITC-PEG2000-Biotin	2 kDa	固体或粘稠液	-20°C 避光储存
FITC-PEG5000-Biotin	5 kDa	粘稠液体	-20°C 避光储存